PCR 过程互动

第一步:排列三个过程的顺序

两种方式皆可:① 直接拖动方块到目标位置;② 点击选中一个方块(变黄),再点击另一个方块,两者交换位置。

    第二步:选择三个过程的温度

    变性
    70
    退火
    70
    延伸(聚合)
    70

    第三步:每一步的目的

    第四步:选择正确的引物(共 2 个)

    引物书写遵循 5'→3' 的方向。请观察下方模板链,结合"互补 + 反向"判断哪两条引物能扩增这段 DNA。

    第五步:进行 PCR 循环

    "自动播放本轮"会连续完成变性→退火→延伸;"下一步"则一步一步播放;播放中可"暂停/继续"。共 3 次循环。

    当前已完成循环数:0 / 3
    当前阶段:尚未开始

    第六步:思考题

    经过 n 次 PCR 循环后,理论上由 1 个亲本 DNA 分子可得到的 DNA 分子总数是:

    第七步:选择定点突变 PCR 的引物(共 2 个)

    定点突变 PCR 中其中一条引物的中间 2 个碱基被人为更改(红色标注),用于在扩增产物中引入突变。请观察下方模板,选出 2 条能够正确启动扩增、并将突变带入新链的引物。

    第八步:进行定点突变 PCR 循环

    观察突变位点(红色碱基)如何在循环中被复制传播。共 3 次循环。

    当前已完成循环数:0 / 3
    当前阶段:尚未开始

    第九步:思考题(突变 DNA)

    从亲本无突变 DNA 开始,第几次定点突变 PCR 循环后,体系中首次出现双链都带突变(完全变异)的 DNA 分子?

    循环 0
    亲本 DNA
    两端为碱基序列,中间序列用直线表示。

    本次 PCR 互动总结

    是否进入"定点突变 PCR"?

    普通 PCR 部分已经完成。接下来你将进入定点突变 PCR:在原有的引物中,引入一条中间 2 个碱基被人为更改的"突变引物",让突变随着扩增传播到产物中。
    点击"开始"进入第七步:选择突变 PCR 的引物。